序列设计
SEQUENCE DESIGN表达优化:密码子与 UTR 优化,提升翻译效率与稳定性
成环设计:环化位点与 IRES 设计,确保高效、正确成环
降低 nicked:减少断裂缺口,提升全长完整率
序列设计与结构优化
工艺开发
PROCESS DEVELOPMENT转录:低 dsRNA、长片段稳定的体外转录体系
成环:circRNA 高效环化(含一步法工艺)
消化:RNase R 定向消化线性前体
回收:环状产物纯化回收
T7 RNA聚合酶 3.0circRNA 合成试剂盒RNase R
质量控制
QUALITY CONTROL成环率:电泳法直观判断成环效率与纯度
纯度分析:dsRNA 残留、加帽率、PolyA 尾分布、完整性检测
circRNA 分离预制胶dsRNA 定量加帽率 / PolyA 检测
LNP 递送
LIPID NANOPARTICLE制备要点:包封工艺关键参数控制,稳定高效包封 mRNA/circRNA
检测方案:粒径 / PDI、包封率、pKa、递送效率表征
LNP 制备与检测技术方案